Lograr el perfilado del punto de control de las células inmunitarias


NewsMedical habla con Cerba Research sobre cómo lograr el perfil de punto de control de células inmunitarias de tumores sólidos mediante inmunofluorescencia multiplex.

¿Podría proporcionar a nuestros lectores una breve introducción a la elaboración de perfiles de puntos de control de células inmunitarias?

Proteínas de punto de control inmunitario como reguladores son cruciales para controlar la autotolerancia y permitir que las células cancerosas eviten la destrucción inmune.

Las terapias de bloqueo de inhibidores de puntos de control (CKI) pueden ayudar a restaurar la inmunidad antitumoral. El bloqueo combinado ha demostrado el potencial de una inhibición del crecimiento tumoral más significativa que las monoterapias en estudios preclínicos.

La inmunofluorescencia multiplex ofrece una ventaja técnica al permitir la detección de la coexpresión y la organización espacial de múltiples objetivos dentro de una arquitectura de tejido conservada en un solo portaobjetos. Cerba Research ha desarrollado el HISTOPROFILE®-Panel de inmunohistoquímica multiplex CKI para ofrecer perfiles personalizados de puntos de control de células inmunitarias.

¿Qué es el Diseño y Validación Multiplex?

Protocolo multiplex secuencial con Opal® (Akoya Biosciences) fluoróforos se llevó a cabo en el teñidor de portaobjetos BOND RX (Leica). El panel multiplex se probó luego en amígdalas humanas sanas y tumores de próstata, hígado, pulmón y piel. Luego se adquirieron imágenes multiespectrales de diapositivas completas con el VECTRA ® Escáner de portaobjetos PolarisTM (Akoya Biosciences) para requisitos de validación.

¿Qué métodos de análisis se aplican durante un estudio típico para lograr la validación?

Las imágenes que adquirimos se suelen analizar con INFORM® (Akoya Biosciences) o HALO® (Indica Labs) Módulo Highplex. Una vez que hemos validado un panel base compuesto por CD3, CD8, muerte celular programada 1, ligando de muerte programada 1 y DAPI (amígdala humana, barra de escala = 100 µm), la posición de interés (Px) en el múltiplex se compara con el protocolo de referencia (IHC simplex) (P1). Luego, se comparó el porcentaje de área positiva entre los dos protocolos para validar el panel. Para evaluar la concordancia, se utiliza HALO, lo que permite la validación del panel múltiplex completo.

¿Cómo se determina la reproducibilidad de los resultados?

Durante tres días, tres operadores diferentes experimentaron con el Histoperfil®-Panel múltiplex CKI. Este enfoque demostró visualmente una tinción equivalente para todos los objetivos. Luego, cada objetivo se analizó en tres escaneos completos usando HALO. Los resultados revelaron perfiles de tinción equivalentes para cada objetivo.

¿Cómo establece la validez de los resultados?

El Histoperfil®-Se probó la solidez del panel múltiplex de CKI con IDO y se detectaron todos los objetivos representativos: CD3, CD8, PD-1, PD-L1, IDO y DAPI en adenocarcinoma de pulmón, carcinoma hepatocelular, adenocarcinoma de próstata y melanoma. Esto ayudó a establecer la validez de los resultados.

¿Puede describir cómo sirve el enfoque para modificar el objetivo del punto de control inmunitario?

El objetivos TIGIT, LAG-3 y CD47 se puede aplicar fácilmente a los paneles base CD3, CD8, PD-1, PD-L1 y DAPI, lo que demuestra la flexibilidad del Histoprofile de Histalim®-Panel múltiplex CKI.

La naturaleza flexible del método facilita la intercambiabilidad de los objetivos del punto de control inmunitario, lo que se traduce en la capacidad de modificar la aplicación en múltiples tipos de tejidos.

Lograr el perfilado del punto de control de las células inmunitarias

Base HISTOPROFILE®-Panel CKI: A) Hemos validado un panel base, compuesto por CD3 (rojo), CD8 (amarillo), muerte celular programada 1 (PD-1, naranja), ligando de muerte programada 1 (PD-L1, verde) y DAPI (azul ) (amígdala humana, barra de escala = 100 μm). Para cada marcador, la posición de interés (Px) en el multiplex se comparó con el protocolo de referencia (IHC simplex) (P1). B) Se comparó el % de área positiva entre los dos protocolos para validar el panel. Crédito de la imagen: Investigación de Cerba

Lograr el perfilado del punto de control de las células inmunitarias

Crédito de la imagen: Investigación de Cerba

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Crédito de la imagen: Investigación de Cerba

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Crédito de la imagen: Investigación de Cerba

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Crédito de la imagen: Investigación de Cerba

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Crédito de la imagen: Cerba Research

Acerca de la investigación de CerbaImageForNews 732049 44890070552106482709

Por más de 35 años, Investigación Cerba ha estado estableciendo el estándar de la industria para la realización de ensayos clínicos ejemplares. Hoy, en los cinco continentes, con un enfoque en la medicina de precisión, estamos cambiando el paradigma del papel del laboratorio central en la investigación clínica compleja.

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